sry livraison à la médullosurrénale augmente la pression artérielle et de la tyrosine médullosurrénale


sry livraison à la médullosurrénale augmente la pression artérielle et de la tyrosine médullosurrénale

Abstrait

Contexte

Méthodes

L’étude suivante a examiné si exogène Sry serait d’élever des surrénales Th, catécholamines surrénales, catécholamines plasmatiques et la pression artérielle. Nous avons livré 10 &# X003bc; g soit la construction d’expression, Sry1 / pcDNA 3.1, ou d’un vecteur de commande dans la médullosurrénale des rats WKY par électroporation. La pression artérielle a été mesurée par la technique du manchon caudal et Th et les catécholamines par HPLC avec détection électrochimique.

Résultats

Conclusion

Ces résultats fournissent un soutien continu que Sry est un gène candidat pour l’hypertension. En outre, ces résultats sont cohérents avec un rôle dans l’augmentation de Sry BP en activant directement ou indirectement l’activité du système nerveux sympathique.

Contexte

Méthodes

Dans une deuxième étude, afin de vérifier que la procédure d’électroporation ne causent pas de dommages surrénale, l’histologie de la glande surrénale a été examinée après électroporation. Après stimulation de l’incision a été fermée et l’animal a permis de récupérer. Le protocole d’électroporation a été suivie et mâle adulte WKY ont été injectés avec Sry1 / pcDNA3.1 (-) (n = 6) ou vecteur vide (n = 6) et électroporation afin d’examiner le tissu endommagé. Un groupe de glandes surrénales WKY de contrôle (n = 6) qui n’a pas été injecté ou introduit par électroporation a également été examinée.

électroporation

Tension artérielle

Analyse de catécholamines

Th et les niveaux de catécholamines surrénale, ainsi que des catécholamines plasmatiques ont été mesurées 3 semaines après l’électroporation. Th et les catécholamines ont été mesurées par HPLC avec détection électrochimique (Waters 2465, Milford, MA). Pour les catécholamines la phase mobile était constituée d’acide citrique (35 mM), de l’acétate de sodium (90 mM), octyl sulfate de sodium (690 &# X003bc; M), EDTA (130 &# X003bc; M) et 10% de methanol, pH ajusté à 4,7. Pour l’analyse de la L-Dopa la même quantité que précédemment ont été utilisés pour la phase mobile, à l’exception du sulfate d’octyle de sodium a été augmentée à 920 &# X003bc; M et ne méthanol a été ajouté. Cela était dû à la libération rapide de L-Dopa de la colonne. La pompe (Waters 1515) a couru à 1,4 ml / min, 50 ul a été injecté sur la colonne (Waters colonne, 4.6 &# X000d7; 150 mm, C18, 5 &# X003bc ;, précédée par une colonne de garde (LC-18, Supelco, Bellfonte, PA). Les échantillons ont été maintenus à 10&# X000b0; C en utilisant le passeur d’échantillons 717 plus (Waters, Milford, MA). Catecholamines ont été extraites du plasma en plaçant 300 &# X003bc; l de plasma dans 1 ml de Tris 1 M, pH 8,7 (composé de Tris 1 M, le métabisulfite de sodium 10 mM, EDTA 20 mM (Sigma) avec 25 mg de LC-alumine A (Supelco, Bellfonte, PA) et vortexer vigoureusement pendant 10 minutes. Les échantillons ont ensuite été lavés 3&# X000d7; avec 1 ml de solution de lavage (0,2% de Tris-EDTA, Sigma), et mélanger 3 minutes suivie d’une aspiration du surnageant après chaque lavage. La dernière étape a été l’ajout de 400 &# X003bc; l de 100 mM d’acide perchlorique et tourbillonnement pendant 5 minutes et l’élimination du surnageant pour l’injection dans la HPLC. L’activité Th a été calculé en mesurant la L-DOPA formée par le tissu milligramme par minute. Les glandes surrénales ont été homogénéisés dans 500 &# X003bc; l de saccharose 0,25 M. L’homogénat (100 &# X003bc; l) a été ajouté à la fois une ébauche de tube et un tube de réaction. La réaction chimique est basée sur des procédures développées par Nagatsu [16] et modifiée par Hooper et al [17] et Kumai et al. [18] suivie d’une extraction en utilisant la même méthode que pour les catécholamines.

Surrénale Morphologie

Dans la deuxième étude, les glandes surrénales ont été éliminés, stockés dans 10% de formaline tamponnée, déshydraté dans un processeur de tissus (Tissue-Tek, Miles Inc., Elkhart, IN) et inclus dans la paraffine (Paraplast plus, Fisher Sei). Les sections ont été coupées à 6 &# X003bc; et colorées avec hématoxyline et éosine (Richard Allan scientifique) afin d’évaluer le tissu pour le potentiel des blessures gène livraison-électroporation.

niveaux BP et catécholamines ont été analysées à l’aide des tests t de Student; moyens et erreur standard des moyens sont rapportés; signification a été prise en compte si p &# X0003c; .05.

Résultats

Vous pouvez également commander ici.

Laisser un commentaire

Votre adresse de messagerie ne sera pas publiée. Les champs obligatoires sont indiqués avec *

9 − 9 =